细菌悬浮液制备
1.1.1仪器
口罩细菌过滤效率(BFE)检测仪、高压蒸汽灭菌器、电子天平、生化培养箱、超净工作台、菌落计数仪。
1.1.2试剂及材料
蒸馏水、75%消毒酒精、胰蛋白酶大豆琼脂(TSA)、胰蛋白胨大豆肉汤培养基(TSB)、蛋白胨、酒精灯、90mm培养皿、500mL锥形瓶。
细菌悬浮液制备
培养基配置
取500mL锥形瓶,按照要求精确称取一定量的TSA培养基,加入合适比例的蒸馏水,包扎后放入高压蒸汽灭菌器,121°C灭菌15min,灭菌结束后取出,待其冷却至约50°C时,将培养基逐个倒入无菌培养皿中,操作应在超净工作台中进行,以酒精灯的火焰周围作为无菌区域,避免杂菌污染,每个培养皿中应倒入约27mL培养基。
无菌确认
待培养基冷却凝固后,将其倒置放入恒温培养箱中,37°C条件下培养24h,将有菌落生长的培养皿舍弃不用,无杂菌生长的取出备用。
细菌悬浮液制备
挑取一环金黄色葡萄球菌ATCC6538接种在适量胰蛋白胨大豆肉汤培养基中,在(37±2)°C振荡培养(24±2)h,然后用1.5%的蛋白胨将上述培养物稀释至约5×105cfu/ml。
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